单壁碳纳米管载锦鲤疱疹病毒ORF149核酸疫苗的构建

• 作者: 尹纪元 曾伟伟 朱斌 李莹莹 王庆 王英英 王高学 胡峰
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 单壁碳纳米管 KHVORF149 DNA疫苗
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 206-213
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0688

摘要

为了开发新型高效疫苗预防锦鲤疱疹病毒病,以单壁碳纳米管(SWCNT)作为运输载体,构建锦鲤疱疹病毒(KHV)ORF149核酸疫苗.首先构建pcDNA3.1(+)-ORF149重组质粒,通过瞬时转染和免疫印迹分析确定其表达情况,然后通过1,3-偶极环加成反应法将重组质粒与SWCNTs进行偶联,最后通过扫描电镜观察和核酸电泳鉴定其偶联是否成功.结果表明,构建的重组质粒转染细胞后经免疫印迹分析和间接免疫荧光试验均能检测到特异性信号;在核酸琼脂糖凝胶电泳中,构建的重组疫苗电泳条带消失;在场发射扫描电镜观察下,与重组质粒进行偶联的SWCNTs和空白SWCNTs形态差异明显.