家蚕Ada3蛋白对杆状病毒复制及宿主细胞凋亡的影响

• 作者: 于威 全滟平 朱亚杰 苗蒙 闫慧慧
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕Ada3蛋白 BmNPV 病毒复制 细胞活力 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 171-177
• 页数: 7页
• 分类号: S881.2+4|S884.5+|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2020.02.006

摘要

基于BmNPV感染前后宿主细胞BmN的蛋白质差异组学研究结果,发现宿主细胞中的BmAda3(B.mori alteration/deficiency in activation 3)蛋白在BmNPV感染前后,其表达水平发生了显著变化.为探究BmAda3蛋白在病毒侵染过程中的作用,构建原核表达载体pET28a-ada3,通过诱导表达、纯化获得目的蛋白并制备多克隆抗体.将构建的瞬时表达栽体pIEx-1-gfp-ada3转染BmN细胞,激光共聚焦显微镜观察发现BmAda3蛋白主要分布在细胞核中.将构建的瞬时表达载体pIEx-1-ada3转染BmN细胞,荧光定量PCR显示BmAda3蛋白的过表达可显著抑制病毒基因组复制.MTT细胞活力检测结果表明,BmAda3蛋白的过表达具有显著增强细胞活力的作用,DNA片段化和流式细胞术检测结果也进一步证实BmAda3蛋白的过表达可在一定程度上抑制BmNPV感染诱导的宿主细胞凋亡.研究结果将为深入了解家蚕细胞与BmNPV的互作调控关系提供一些新的线索.