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摘要:
目的 探讨雌激素相关受体α(estrogen-related receptor alpha,ERRα)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)炎症反应的影响及其机制.方法 体外培养PMVECs细胞株,当细胞处于对数生长期时利用慢病毒转染细胞,并构建稳定低表达的ERRα细胞株.将细胞分别为四组:正常对照组(Ctr组)、正常细胞+LPS处理组(Ctr+LPS组)、shERRα 1基因敲低组(shERRα 1组)和shERRα 1基因敲低组+LPS处理组(shERRα1+LPS组).予20μg/mL的LPS分别刺激对照组和基因敲低组细胞6、12和24 h后,应用cell counting kit-8(cck-8)检测各组细胞的增殖能力;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β (IL-1 β)的浓度,于LPS刺激12 h后采用Western blot检测各组细胞ERRα及NF-κ B通路的相关蛋白(p-p65、p65、P-IKB α、IKBα)的表达水平.两组变量比较采用SNK-q检验,多组变量比较采用单因素方差分析,方差不齐时则用秩转换的非参数检验.以P<0.05为差异有统计学意义.结果 与对照组相比,shERRα1组ERRα蛋白的表达量明显降低(0.09±0.01 vs 0.15±0.01);于LPS刺激6、12和24 h后,与对照组相比,shERRα1+LPS组细胞增殖能力明显降低[(99.68±4.53)%vs(48.62±1.60)%];细胞培养上清液中的TNF-α(ng/mL)、IL-1 β(ng/mL)的浓度明显升高,于刺激12h后变化最为明显(15.76±3.38 vs5 498.91±367.95;14.41±3.86 vs 6 014.92±277.33).同时,shERRα1+LPS组p-p65(0.30±0.5 vs 1.05±0.07)、p-IKBα(0.27±0.04 vs 0.77±0.06)表达量明显升高,而IKB α的表达量明显降低(0.96±0.07 vs 0.14±0.04),差异均具有统计学意义(均P<0.05).结论 ERRα基因通过抑制NF-κ B信号通路激活,缓解LPS诱导的大鼠肺微血管内皮细胞炎症反应.
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文献信息
篇名 雌激素相关受体α在脂多糖诱导的肺微血管内皮细胞炎症反应的作用
来源期刊 中华急诊医学杂志 学科
关键词 脓毒症 雌激素相关受体α NF-κB通路 基因敲低
年,卷(期) 2020,(1) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 65-70
页数 6页 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2020.01.010
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 夏文芳 湖北省武汉大学人民医院重症医学科 1 0 0.0 0.0
2 潘舟 湖北省武汉大学人民医院重症医学科 1 0 0.0 0.0
3 张桓铭 山东省临沂市中心医院重症医学科 1 0 0.0 0.0
4 李光 湖北省武汉大学人民医院重症医学科 2 4 1.0 2.0
5 周青山 湖北省武汉大学人民医院重症医学科 1 0 0.0 0.0
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脓毒症
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基因敲低
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中华急诊医学杂志
月刊
1671-0282
11-4656/R
大16开
杭州市解放路88号
32-41
1994
chi
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