β-抑制蛋白1通过促进IL-6基因启动子区乙酰化调控非小细胞肺癌的细胞增殖和凋亡

• 作者: 刘文会 杨斌 王晓强 赵鑫鑫 郑玄
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,非小细胞肺 β-抑制蛋白1 白细胞介素6 乙酰化作用 信号转导及转录激活因子3
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 329-338
• 页数: 10页
• 分类号: R730.26
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2020.11.040

摘要

目的:探讨β-抑制蛋白1(β-arrestin 1,ARRB1)对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响,并研究其可能的分子作用机制.方法:在非小细胞肺癌细胞系A549和H1650中,通过转染小干扰RNA的方法敲低ARRB1基因表达,或通过转入Flag标签的ARRB1基因重组质粒使ARRB1基因过表达,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证转染效果.采用实时荧光定量PCR和ELISA法分别检测干扰和过表达ARRB1对白细胞介素6(interleukin-6,IL-6) mRNA转录和分泌水平的影响.采用蛋白免疫共沉淀法检测ARRB1与IL-6关键调控分子p300的相互作用.采用染色质免疫共沉淀法检测干扰或过表达ARRB1对IL-6基因启动子区p300富集和组蛋白乙酰化修饰的影响.采用CCK-8法和FCM法分别检测干扰ARRB1表达对非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响.采用蛋白质印迹检测干扰或过表达ARRB1对IL-6/信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路相关分子活化和表达的影响.结果:在非小细胞肺癌细胞系A549和H1650中有效敲低或过表达ARRB1后发现,ARRB1可促进IL-6的转录和分泌(P值均＜0.05);正向和反向蛋白免疫共沉淀均检测到ARRB1与p300相互作用;同时发现ARRB1能促进p300在IL-6基因启动子区的富集(P值均＜0.01),提高IL-6基因启动子区的乙酰化水平(P值均＜ 0.05),促进非小细胞肺癌细胞增殖(P值均＜0.01),抑制细胞凋亡.另外,ARRB1能提高STAT3磷酸化活化水平以及c-Myc和Bcl-2的表达水平.结论:在非小细胞肺癌细胞中,ARRB1能够与p300相互作用,并促进p300向IL-6基因启动子区募集,从而提高IL-6基因启动子区组蛋白H3和H4的乙酰化水平,诱导IL-6的转录活化和分泌,并进一步触发IL-6/STAT3信号通路转导,提高STAT3磷酸化活化水平,使下游c-Myc和Bcl-2表达量增加,从而促进细胞增殖并抑制细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨斌		5	8	1.0	2.0
2	郑玄		4	8	1.0	2.0
3	王晓强		8	6	1.0	2.0
4	赵鑫鑫		4	0	0.0	0.0
5	刘文会		1	0	0.0	0.0