日本沼虾血清淀粉样蛋白A(SAA)基因的克隆及其免疫功能

• 作者: 李书凯 李学军 林鑫辉 江红霞 王洁琛
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 日本沼虾 血清淀粉样蛋白A 基因克隆 组织表达 病原体感染 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 页码范围: 300-313
• 页数: 14页
• 分类号: Q785|S945.4
• 字数: 9666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20181211581

摘要

为探索血清淀粉样蛋白A(SAA)在日本沼虾免疫防御系统中的作用,实验利用RACE方法克隆了日本沼虾SAA(MnSAA)基因cDNA全长序列,采用实时荧光定量PCR(QPCR)分析其在日本沼虾不同组织、不同发育时期的表达情况,以及溶壁微球菌、嗜水气单胞菌和白斑综合征病毒(WSSV)感染后MnSAA在血淋巴细胞和肝胰腺中的表达情况,同时还利用RNA干扰(RNAi)技术检测了MnSAA基因沉默后,日本沼虾再感染嗜水气单胞菌后其肝胰腺中激活子蛋白-1(AP-1)和B类清道夫受体(CD36)基因表达变化及虾的累积死亡率变化.结果显示,MnSAA基因cDNA全长649 bp(GenBank登录号:MK292888),包含21 bp 5′非编码区,232 bp 3′非编码区,369 bp开放读码框,编码131个氨基酸残基;氨基酸序列比对及系统进化分析结果显示,MnSAA蛋白属于急性期血清淀粉样蛋白A蛋白(A-SAA),在进化上与无脊椎动物香港牡蛎的亲缘关系最近;mRNA表达分析显示,MnSAA基因在日本沼虾的各组织和各生长阶段均有表达,分别在肝胰腺和成虾阶段中的表达量最高;病原体感染实验表明,在日本沼虾感染溶壁微球菌、嗜水气单胞菌和白斑综合征病毒后12～72 h,其血淋巴和肝胰腺中的MnSAA基因表达量与对照组相比均显著升高;RNAi实验显示,MnSAA基因沉默后,日本沼虾肝胰腺中AP-1和CD36基因分别在其感染嗜水气单胞菌后12～72 h和6～72 h与对照组相比显著下降,日本沼虾累积死亡率在感染嗜水气单胞菌后与对照组相比明显升高.研究表明,MnSAA参与日本沼虾的抗病原体感染的反应,在日本沼虾的免疫防御体系中具有重要的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李学军	河南师范大学水产学院	116	606	14.0	20.0
2	江红霞	河南师范大学水产学院	30	111	6.0	8.0
3	林鑫辉	河南师范大学水产学院	1	0	0.0	0.0
4	李书凯	河南师范大学水产学院	1	0	0.0	0.0
5	王洁琛	河南师范大学水产学院	1	0	0.0	0.0