多重PCR-毛细管电泳检测儿童5种腹泻病毒的方法建立及应用

• 作者: 孟青 朱纯青 田洁 肖丽霞 蔡德丰 陈运生 马东礼
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 儿童 腹泻病毒 多重PCR 毛细管电泳
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: R446.5
• 字数: 3249字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2020.01.04

摘要

目的 建立肠道腺病毒(Adv)、诺如病毒G1及G2型(NoV G1和NoV G2)、A组轮状病毒(RV A)、扎如病毒(SV)及星状病毒(HAstV)5种儿童腹泻病毒多重PCR-毛细管电泳法检测体系.方法 针对Adv、NoV G1、NoV G2、RV A、SV及HAstV保守序列设计特异性引物,设计并优化腹泻病毒的多重PCR-毛细管电泳检测体系,琼脂糖凝胶电泳确认扩增片段;进行性能(灵敏度、特异性)评估;收集185例儿童病毒样腹泻样本,采用多重PCR-毛细管电泳体系进行检测,并通过测序验证阳性结果 .结果 所设计引物特异性扩增出5种腹泻病毒;多重PCR-毛细管电泳检测体系检出限为102～103 copies/μL,CV均<10％;其他腹泻病原体未出现交叉反应,无明显的非特异杂峰,特异性较好;185例临床病毒样腹泻样本检测阳性132例(71.35％),其中RV A 105例(56.8％)、Adv 22例(11.9％)、SV 15例(8.1％)、NoV G211例(5.9％)和HAstV 10例(5.4％),其中包括双病毒感染样本;毛细管电泳进样量需20μL,3 h内完成全部分析;测序结果 与GeneBank比对分析,序列一致.结论 成功建立一种能够快速筛查5种常见儿童腹泻病毒的多重PCR-毛细管电泳检测方法 .

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马东礼	深圳市儿童医院检验科	54	287	9.0	13.0
2	陈运生	深圳市儿童医院检验科	53	240	9.0	12.0
3	蔡德丰	深圳市儿童医院检验科	12	37	4.0	5.0
4	肖丽霞	深圳市儿童医院检验科	9	25	3.0	4.0
5	朱纯青	深圳市儿童医院检验科	7	7	1.0	2.0
6	孟青	深圳市儿童医院检验科	2	2	1.0	1.0
7	田洁		1	0	0.0	0.0