14-3-3σ基因在调控内毒素/脂多糖诱导的人肺上皮细胞炎症反应中的作用

• 作者: 付忠华 刘名倬 廖新成 曾小平 王红梅 甘春霞 郭光华
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 关键词: 内毒素类 脂多糖类 炎症 14-3-3σ Bax/B淋巴细胞瘤-2基因 肺上皮细胞
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著·烧创伤相关肺损伤
• 页码范围: 260-266
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2020.04.103

摘要

目的 探讨14-3-3σ基因在调控内毒素/脂多糖(LPS)引发人肺上皮细胞炎症反应中的机制. 方法 (1)取培养的对数生长期人正常肺上皮细胞BEAS-2B,按照随机数字表法分为对照组、PCMV6-14-3-3σ组,每组3孔.对照组细胞转染空载质粒,PCMV6-14-3-3σ组细胞转染PCMV6-14-3-3σ质粒.转染48 h,蛋白质印迹法检测细胞内14-3-3σ蛋白表达.(2)取培养的对数生长期人正常肺上皮细胞BEAS-2B,按照随机数字表法分为对照组、PCMV6-14-3-3σ组、PCMV6-14-3-3σσ+LPS组、LPS组,每组3孔.对照组细胞转染空载质粒孵育42 h,PCMV6-14-3-3σ组细胞转染PCMV6-14-3-3σ质粒孵育42 h,PCMV6-14-3-3σ+ LPS组细胞转染PCMV6-14-3-3σ质粒42 h后加入LPS(终质量浓度1μg/mL,下同)刺激6h,LPS组细胞仅加入LPS刺激6h.蛋白质印迹法检测Bax、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)的蛋白表达,计算两者比值;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量反转录PCR技术检测细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达量;酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中TNF-α、IL-1β含量.对数据行t检验、单因素方差分析、LSD检验.结果 (1)与对照组(0.78±0.04)比较,转染48 h PCMV6-14-3-3σ组细胞14-3-3σ蛋白表达水平(1.05±0.03)明显升高(t=5.41,P＜0.01).(2)与对照组比较,PCMV6-14-3-3σ组细胞Bax/Bcl-2比值、细胞凋亡率、TNF-α mRNA及IL-1β mRNA表达量、细胞上清液中TNF-α及IL-1β含量均无明显变化(P＞0.05),LPS组细胞上述指标均明显升高或增加(P＜0.01).与LPS组比较,PCMV6-14-3-3σ+ LPS组细胞上述指标明显下降或减少(P＜0.01). 结论 14-3-3σ是调控细胞凋亡的重要因子,通过调节凋亡调控因子Bax/Bcl-2比值,抑制人肺上皮细胞凋亡,从而减轻LPS诱导的炎症反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王红梅	南昌大学病理生理教研室	29	111	5.0	9.0
2	郭光华	南昌大学第一附属医院烧伤科	142	812	14.0	18.0
3	付忠华	南昌大学第一附属医院烧伤科	22	92	6.0	9.0
4	刘名倬	南昌大学第一附属医院烧伤科	17	59	5.0	7.0
5	曾小平	南昌大学免疫教研室	26	83	6.0	8.0
6	廖新成	南昌大学第一附属医院烧伤科	16	111	7.0	10.0
7	甘春霞	南昌大学第一附属医院烧伤科	3	0	0.0	0.0