人巨细胞病毒gH蛋白表达及其单克隆抗体的制备

• 作者: 刘乐 刘如石 廖旻晶 徐叶 王庆林 钟志宏
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 gH糖蛋白 单克隆抗体 病毒捕获
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 260-267
• 页数: 8页
• 分类号: R392.9
• 字数: 7194字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2020.03.010

摘要

人巨细胞病毒(HCMV)是全球范围内普遍感染的一种疱疹病毒,也是引起胎儿先天性畸形和器官移植受者死亡最常见的病原体.有研究表明,gH蛋白是HCMV主要的中和性抗原,特异性抗gH抗体具有中和HCMV及阻断病毒在细胞间传播的潜力.本研究以含人巨细胞病毒临床株Toledo全基因组的细菌人工染色体(BAC)为模板,扩增去除信号肽和跨膜区的gH基因片段,并将其插入表达载体构建pET32a'-gH重组表达质粒,将序列鉴定正确的重组质粒转化进入表达菌株TransB,诱导重组蛋白表达.用纯化的重组gH蛋白免疫8周龄BALB/c雄鼠,经杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗gH单克隆抗体的细胞株,分别命名为8 A9、8 B4、8 C4、8 D9、8D12.所获5株单克隆抗体对gH蛋白均具有良好的反应性,其中8A9、8B4、8D9和8D12具有一定的病毒捕获能力,且8D9和8D12的捕获能力较强.本研究获得了具有自主知识产权的抗gH单克隆抗体,抗体具有良好的病毒捕获能力.在此基础上,我们将进一步鉴定其是否为中和抗体,为今后开发治疗HCMV感染的中和抗体奠定基础.