PCR-RFLP在VVC相关念珠菌菌种鉴定中的应用

• 作者: 丁文静 文田甜 渠巍
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 限制性片段长度多态性聚合酶链反应 念珠菌 方法学评价
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 11-14
• 页数: 4页
• 分类号: R446.5
• 字数: 3921字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2020.01.03

摘要

目的 用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术快速准确鉴定外阴阴道念珠菌病(VVC)相关念珠菌菌种,并对科玛嘉显色培养法、Vitek 2 YST鉴定卡和PCR-RFLP 3种方法 鉴定念珠菌菌种的效果进行方法 学评价.方法 收集贵阳市妇幼保健院VVC患者感染的念珠菌菌种100株,用十六烷基三甲基溴化铵法(cetyltrimethylammonium bromide,CTAB)法提取念珠菌DNA,PCR扩增念珠菌DNA的ITS片段并进行测序分析确定念珠菌菌种;分别采用科玛嘉显色培养法、Vitek 2 YST鉴定卡和PCR-RFLP 3种方法 对其进行鉴定,以测序结果 为"金标准",比较3种方法 鉴定念珠菌菌种的正确率.结果 科玛嘉显色培养法中5株葡萄牙念珠菌与2株酿酒念珠菌显色错误,均显淡紫色;Vitek 2 YST鉴定卡中,1株白念珠菌与2株热带念珠菌鉴定不出,Cyberlindnera fabianii、Candida orthopsilosis与Candida metapsilosis鉴定错误;PCR-RFLP采用内切酶MspⅠ可成功鉴定念珠菌中除Candida metapsilosis、Candida orthopsilosis与近平滑念珠菌之外的其他菌种,进一步采用内切酶ApaⅠ与NcoⅠ可将Candida metapsilosis、Candida Orthopsilosis与近平滑念珠菌三者鉴别开.科玛嘉显色培养法对白念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌等3种念珠菌鉴定正确率100％,对光滑念珠菌的鉴定正确率为73.1％;Vitek 2 YST鉴定卡可鉴定常见念珠菌且正确率较高,不能鉴定Cyber-lindnera fabianii、Candida orthopsilosis与Candida metapsilosis等非常见念珠菌;PCR-RFLP技术可快速准确鉴定所有念珠菌菌种.结论 PCR-RFLP技术为早期准确鉴定临床念珠菌感染提供了新的选择,具有很好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	渠巍	贵阳市妇幼保健院检验科	15	43	4.0	5.0
2	丁文静	贵阳市妇幼保健院检验科	3	2	1.0	1.0
3	文田甜	贵阳市妇幼保健院检验科	1	0	0.0	0.0