摘要:
目的 观察大鼠缺血心肌组织中BNP mRNA及蛋白时序性表达.方法 在GEO数据库中检索到大鼠急性心肌缺血基因表达谱数据GSE4648,分析并设计实验验证.66只10-12周龄雄性SD大鼠分为对照组(n=6)、过敏性猝死组(n=6)、假手术组(n=6)及早期心肌缺血组(n=48).早期心肌缺血组结扎左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型,分别于造模成功后0.5,1,2,4,8,12,24,48 h脱臼处死大鼠,取左心室前壁缺血区心肌.假手术组缝合线穿过左心室前壁心肌组织,而不结扎冠状动脉,脱臼处死大鼠,取左心室前壁心肌组织.过敏性猝死组大鼠尾静脉注射鸡卵清蛋白诱导过敏性猝死模型,猝死后取左心室前壁心肌组织.对照组常规饲养1周后脱臼处死,取左心室前壁心肌.应用qRT-PCR、Western blot及免疫组化法检测所取心肌BNP mRNA及蛋白表达情况.结果 GSE4648基因表达谱数据显示大鼠心肌缺血4 h时荧光信号强度开始升高,缺血24 h荧光信号达到最强,缺血48 h荧光信号开始减弱.验证实验显示,与对照组相比,大鼠心肌缺血2 h时,缺血区心肌BNP mRNA开始升高(P<0.05),并于缺血24 h时达到峰值(P<0.01),缺血48 h时下降,但仍高于对照组(P<0.01).与对照组相比,大鼠心肌缺血4 h时,BNP蛋白表达开始上升(P<0.05),在缺血12 h和24 h时达到最高峰(P<0.01),缺血48 h时下降,但仍高于对照组(P<0.05).大鼠心肌缺血4 h时,缺血区心肌免疫组化出现弱阳性(P<0.05),之后逐渐增强,缺血24 h时达到强阳性(P<0.01),缺血48 h阳性减弱,但仍高于对照组(P<0.05).对照组、假手术组及过敏性猝死组三组间心肌BNP mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 早期心肌缺血时存在BNP mRNA升高;检测BNP mRNA可能对鉴别冠状动脉性猝死和过敏性休克死亡有帮助.