氧诱导视网膜病变小鼠视网膜组织中miRNA的表达及分析

• 作者: 东莉洁 刘勃实 刘勋 李筱荣 洪雅茹 王琼 韩金栋 黄亮瑜 黄欣远
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 关键词: 视网膜新生血管化/病因学 微RNAs 动物实验
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 544-550
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn511434-20190203-00043

摘要

目的 观察氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜组织中miRNA的表达,筛选与视网膜新生血管(RNV)有关的miRNA.方法 80只健康7日龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组和OIR组,每组40只.OIR组小鼠构建OIR模型,对照组小鼠不做任何处理.小鼠17日龄时,做视网膜荧光铺片,荧光显微镜下观察小鼠RNV发生情况;做视网膜病理切片HE染色,光学显微镜下计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核.取视网膜组织行miRNA芯片分析,检测对照组与OIR.组之间差异表达的miRNA,并行PCR验证.所得差异miRNA靶基因和表达谱分别进行基于基因注释(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)的富集分析.组间两两比较采用独立样本t检验.结果 荧光显微镜及光学显微镜观察发现,对照组小鼠视网膜未见无灌注区、新生血管及突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核;OIR组小鼠视网膜可见大量无灌注区、新生血管及突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核.两组小鼠突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数量比较,差异有统计学意义(t=9.025,P＜0.05).miRNA芯片分析结果显示,与对照组比较,OIT组有54个miRNA发生了具有统计学差异的表达.其中,上调者47个,下调者7个.miRNA差异表达倍数大于1.25倍者23个,小于0.75倍者5个.PCR验证结果显示,差异表达倍数最高的5个miRNA表达趋势与芯片分析结果一致,差异均有统计学意义(P＜0.05).GO分析共得到1112个差异有统计学意义的条目(P＜0.05);KEGG分析共得到65个差异有统计学意义的条目(P＜0.05).结论 OIR小鼠视网膜组织中miRNA较正常小鼠视网膜组织有54个表达差异显著的miRNA;表达差异的miRNA可能不同程度参与了RNV的发生发展.