羽衣甘蓝类蛋白质二硫键异构酶PDIL1-2的基因克隆及蛋白表达分析

• 作者: 施亚坤 李晓屿 李阳 蓝兴国 高士科
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 农学
• 关键词: 羽衣甘蓝 类蛋白质二硫键异构酶 原核表达 多克隆抗体 表达分析
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 293-300
• 页数: 8页
• 分类号: S635
• 字数: 5228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7525/j.issn.1673-5102.2020.02.017

摘要

以羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)自交不亲和系(S13-bS13-b)为试材,利用RT-PCR和RACE的方法从柱头中分离类蛋白质二硫键异构酶BoPDIL1-2基因.将BoPDIL1-2编码区的序列构建到原核表达载体pET-14b上,并转化到大肠杆菌中进行原核表达与纯化;用纯化后的蛋白免疫小鼠,制备BoPDIL 1-2多克隆抗体;通过免疫印迹法检测BoPDIL1-2在不同组织及不同发育阶段柱头的表达情况.氨基酸序列比对分析结果显示,羽衣甘蓝BoPDIL1-2与油菜BnPDIL1-2、拟南芥AtPDIL1-2的一致性分别是97.3％和85.5％.SDS-PAGE结果显示,在分子量58 kD处有BoPDIL1-2蛋白特异性地诱导表达.免疫印迹结果显示BoPDIL1-2在羽衣甘蓝柱头中特异表达,而且在柱头发育早期表达量较低,在开花期柱头表达量较高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蓝兴国	东北林业大学生命科学学院	35	138	5.0	10.0
2	李阳	东北林业大学生命科学学院	15	65	4.0	7.0
3	李晓屿	东北林业大学生命科学学院	12	10	2.0	2.0
4	施亚坤	东北林业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
5	高士科	东北林业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0