马脂肪间充质干细胞的分离培养与生物学特性试验

• 作者: 刘璨颖 王丙云 王彩莹 白银山 罗冬章 罗惠娜 詹小舒 陈志胜 陈胜锋 雷彬 黄国健
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 马 脂肪 间充质干细胞 生物学特性
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 31-35
• 页数: 5页
• 分类号: S821.9
• 语种: 中文

摘要

为马的关节炎、肌腱和韧带损伤的临床治疗提供种子细胞,本试验通过采集马颈部脂肪组织,采用I型胶原酶消化法分离脂肪间充质干细胞,并进行传代培养;绘制细胞生长曲线、测定细胞群体倍增时间;通过流式细胞术检测P3代细胞表面标记物,RT-PCR法扩增细胞表面标记物目的基因片段;油红O和茜素红染色法测定脂肪间充质干细胞的成脂和成骨诱导分化能力.结果 发现:马脂肪间充质干细胞体外培养条件下呈长梭形和典型的旋涡状,生长状态良好、折光性强;经测定细胞生长曲线呈典型的“S”型,符合Logistic生长曲线规律;P3、P6和P9代细胞群体倍增时间分别为21.5 h、26 h、36 h;流式细胞术检测结果显示,P3代细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD44、CD90和CD105,不表达造血系细胞表面标志物CD45;PCR扩增得到CD44、CD90、CD105和CD73特异性目的片段;油红O和茜素红染色证明,马脂肪间充质干细胞具有成脂和成骨诱导分化能力.