猪细小病毒病毒样颗粒的制备及其免疫评价

• 作者: 冯景 刘东民 刘运超 周景明 陈玉梅 马丽萍
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 VP2蛋白 病毒样颗粒 疫苗 免疫评价
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 131-137
• 页数: 7页
• 分类号: S855.3
• 字数: 5839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.04.019

摘要

为了研制猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗,结合大肠杆菌密码子偏好性,经密码子优化,合成猪细小病毒VP2蛋白编码区序列,并将其插入原核表达载体pET28a中,随后转化BL21(DE3)感受态细胞,再转入伴侣蛋白质粒pTf16构建共表达载体,优化诱导表达条件,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果表明,在L-阿拉伯糖质量浓度为2 mg/mL、IPTG浓度为0.1 mmol/L、温度为30℃、诱导12 h时重组蛋白VP2可溶性表达量最高,经硫酸铵沉淀和Ni-NTA亲和层析纯化获得纯度约90％的VP2蛋白,体外装配可形成直径约20 nm的具有血凝活性的VLPs.用制备的VLPs免疫昆明鼠并对其进行免疫评价,结果表明,制备的VLPs能有效刺激机体产生高滴度抗体,ELISA效价高达1:25600.可见,制备的VLPs能刺激机体产生特异性抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马丽萍	郑州大学生命科学学院	7	94	3.0	7.0
2	周景明	郑州大学生命科学学院	33	141	7.0	10.0
3	陈玉梅	郑州大学生命科学学院	11	7	2.0	2.0
4	刘东民		1	0	0.0	0.0
5	冯景		1	0	0.0	0.0
6	刘运超		1	0	0.0	0.0