桃拉综合征病毒的环介导等温扩增联合横向流动试纸条(LAMP-LFD)检测方法的建立

• 作者: 刘露 李丽娜 李伟哲 肖勤
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 横向流动试纸条 环介导等温扩增 桃拉综合征病毒 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 页码范围: 79-85
• 页数: 7页
• 分类号: S942.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2020.0056

摘要

桃拉综合征病毒(Taura syndrome virus,TSV)是威胁虾类养殖业的主要病毒之一.本试验建立了一种快速检测TSV的环介导等温扩增联合横向流动试纸条(LAMP-LFD)方法,并与荧光定量PCR(qPCR)进行了对比.基于TSV的衣壳蛋白VP2核酸序列,设计3对特异性引物(外引物:FIP/BIP,内引物:F3/B3,环引物:LF/LB),进行LAMP反应体系的优化.其中引物LF以BIO标记,LB以FAM标记,用于横向流动试纸条(LFD)的检测.结果 表明:LAMP最佳反应可在63 ℃恒温条件下40 min内完成.整个扩增反应到LFD结果判定可在45 min内完成.LAMP-LFD可特异性检出TSV特异性片段,未与其它病毒和细菌发生交叉反应,且其检测限为22.9 fg.与qPCR相比,本研究所建立的LAMP-LFD检测体系虽然检测限高于qPCR 10倍,但比qPCR检测时间缩短近1h,且LAMP-LFD特异性强、操作简单,无需特殊仪器设备,可快捷、方便地检测出TSV,满足TSV基层快速检测的需要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李丽娜	河北农业大学海洋学院	13	36	4.0	5.0
2	肖勤	河北农业大学海洋学院	12	117	4.0	10.0
3	刘露	河北农业大学海洋学院	7	5	1.0	2.0
4	李伟哲	河北农业大学生命科学学院	4	5	1.0	2.0