靶向调控缝隙连接蛋白43对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

• 作者: 张振伟 林利忠 林泽金 谢锡洪
• 来源期刊: 骨科
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 缝隙连接蛋白43 成骨分化 慢病毒
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 149-154
• 页数: 6页
• 字数: 4391字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8573.2020.02.011

摘要

目的 探讨缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesen-chymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响.方法 将Cx43目的基因克隆后与慢病毒载体pHBLV-CMVIE-Puro进行连接,重组载体与包装载体共同转染293T细胞后包装生产病毒.获取小鼠BMSCs,流式细胞术检测细胞表面标志.将慢病毒载体pHBLV-Cx43-Puro(Cx43组)、pHBLV-CMVIE-Puro(空载体组)转染BMSCs,同时设立空白对照组;Western blot和qRT-PCR检测三组细胞中Cx43的表达.成骨诱导培养基诱导三组细胞成骨分化,qRT-PCR检测成骨相关基因Runt相关转录因子2(runt-related transcrip-tion factor 2,Runx2)、锌指结构转录因子(Osterix/Sp7)、转录活化因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、骨唾蛋白(bone sialoprotein,BSP)的表达;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测试剂盒定量分析三组BMSCs的成骨分化能力.结果 流式细胞术检查示BMSCs中CD29、CD44、CD90呈阳性表达,而CD14和CD34呈阴性表达,pHBLV-Cx43-Puro转染BMSCs后Cx43蛋白和mRNA表达显著增加.成骨诱导后Cx43组成骨相关基因Runx2、Osterix/Sp7、ATF4和BSP的mRNA表达显著高于其他两组(P均＜0.05),ALP活性明显高于其他两组(P＜0.05).结论 Cx43高表达能够显著促进BMSCs向成骨细胞分化,其可能成为骨损伤修复的有效靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张振伟	广州医科大学附属深圳沙井人民医院手外科	17	41	4.0	5.0
2	谢锡洪		1	0	0.0	0.0
3	林泽金	深圳市龙华区中心医院创伤骨科	8	15	2.0	3.0
4	林利忠	深圳市龙华区中心医院创伤骨科	6	31	2.0	5.0