断裂内含肽介导的亲和介质与亲和标签的应用

• 作者: 周挺峻 夏海锋 杜夜星 陈浩然
• 来源期刊: 高校化学工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Cfa断裂内含肽 蛋白纯化 亲和层析 剪切 无标签纯化
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 生物化工
• 页码范围: 438-446
• 页数: 9页
• 分类号: Q819
• 字数: 5464字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-9015.2020.02.019

摘要

应用Cfa断裂内含肽构建了一种新型的亲和纯化系统,并完成对目的蛋白无标签纯化.首先对Cfa断裂内含肽的IN片段与IC片段进行分子改造,通过研究在自由混合条件下的断裂情况,测定了其断裂速率.其次以改造后的IN片段作为配体与环氧活化的琼脂糖微球载体偶联,制备了IN亲和层析介质;IC片段作为亲和标签与目的蛋白GFP融合,并利用IN亲和层析介质实现对目的蛋白进行无标签纯化.结果表明,将IN与IC-GFP片段混合后,30 s内即可断裂超过50％,4 h内即可完全断裂;IN亲和层析介质的静态载量为66.78 mg·mL-1,动态吸附载量约为30 mg·mL-1;纯化后的绿色荧光蛋白(GFP)纯度达到了96.7％,回收率为29.3％.Cfa断裂内含肽的应用为开发新型亲和纯化技术提供了一种潜在的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏海锋	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	26	96	5.0	8.0
5	杜夜星	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	3	0	0.0	0.0
6	周挺峻	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
7	陈浩然	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0