利用一步克隆方法快速高效构建 Gateway入门载体

• 作者: 张可伟 张艳军 李雨佳 赵利 赵江哲
• 来源期刊: 浙江师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 入门克隆 SLIC技术 Gateway LR重组反应
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 72-76
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 4004字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16218/j.issn.1001-5051.2020.01.013

摘要

Gateway技术是一种非常便捷的载体构建方法,但目前构建入门克隆的方法成本较高,且存在一定的局限性.利用限制酶EcoRⅠ对pCR8-AtS5H入门克隆进行单酶切,获得入门载体pCR8片段,然后利用不依赖序列和连接的一步克隆方法(one-step sequence-and ligation-independent cloning,One-SLIC)将纯化后水稻异分支酸合成酶基因的启动子(ICS1pro)片段连接至pCR8入门载体,并通过菌落PCR和测序方法鉴定得到阳性入门克隆,最后通过LR重组反应将ICS1pro片段转移至Gateway目的载体pMDC163上.这种利用One-SLIC法快速高效构建入门克隆的方法操作简便,成功率高且成本低,是一种具有广泛应用前景的Gateway入门载体构建方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张艳军	浙江师范大学化学与生命科学学院植物遗传发育研究所	10	11	2.0	2.0
2	赵江哲	浙江师范大学化学与生命科学学院植物遗传发育研究所	3	13	2.0	3.0
3	赵利	浙江师范大学化学与生命科学学院植物遗传发育研究所	2	2	1.0	1.0
4	张可伟	浙江师范大学化学与生命科学学院植物遗传发育研究所	2	2	1.0	1.0
5	李雨佳	浙江师范大学化学与生命科学学院植物遗传发育研究所	1	2	1.0	1.0