检测气单胞菌属的SYBR Green荧光PCR方法的建立和评价

• 作者: 刘九银 卢昕 周海健 崔志刚 杜小莉 江良梁 洪颖 王利 阚飙 陈谨
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 气单胞菌 荧光PCR 分子检测
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 425-429
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.05.013

摘要

目的 建立一种检测气单胞菌的SYBR Green荧光PCR方法.方法 使用文献报道的气单胞菌属16S rRNA基因扩增引物,建立SYBR Green荧光PCR检测方法,评价其特异性、灵敏度和实际应用价值.结果 SYBR Green荧光PCR方法的检测下限为10-7 ng/ml,检测的21株气单胞菌均为阳性,检测的弧菌、大肠埃希菌、沙门菌、小肠结肠炎耶尔森菌、志贺菌均为阴性.针对104份健康人群粪便样本,8.65％的样本分离到气单胞菌,28.85％的样本SYBR Green荧光PCR方法检测阳性.其中8份标本采用2种方法检测均为阳性.样本核酸检测阳性后再进行病原菌的分离,会漏检1份样本(11.11％),但可以减少71.15％(74/104)的分离培养及鉴定工作.结论 SYBR Green荧光PCR方法具有很好的特异性和敏感度,用于大样本的早期筛查可以减少70％左右的工作量,适合应用于气单胞菌感染和携带的监测.