一种荧光RPA方法鉴定伊蚊的研究

• 作者: 李颖 张晓龙 慈颖 刘莹莹 杨燕 曹晓梅
• 来源期刊: 寄生虫与医学昆虫学报
• 关键词: 伊蚊 荧光RPA 分类鉴定
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 著述
• 页码范围: 244-250
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-0507.2020.04.008

摘要

本研究旨在建立一种基于荧光RPA技术的伊蚊鉴定方法.以白纹伊蚊和埃及伊蚊为例,分别根据其rDNA-ITS2序列设计了特异性RPA引物和探针,通过基础RPA方法进行引物筛选,扩增产物测序后在NCBI数据库中进行Blast比对分析,并与COI基因序列分析结果比较,以验证该方法的准确性.然后,进行特异性、灵敏度、重复性实验.结果显示,本研究建立的荧光RPA方法的鉴定结果与基于COⅠ基因序列的分析鉴定结果一致.该方法在39℃条件下20 min即可完成检测,与刺扰伊蚊、背点伊蚊、三带喙库蚊、中华按蚊、常型曼蚊DNA均无交叉反应,对目的DNA的检测下限为0.01 ng/μL,3个平行的变异系数值均<5％.结果表明,本研究建立的伊蚊荧光RPA鉴定方法,特异性强、灵敏度高、重复性好,操作简便、快速,适合于蚊虫DNA的分子分类鉴别检测.