速冻面米制品中金黄色葡萄球菌和肠毒素A基因三重PMA-qPCR快检方法的建立

• 作者: 史贤明 宋明辉 施春雷 李琼琼 杨美成
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 速冻面米制品 金黄色葡萄球菌 肠毒素A基因 叠氮溴化丙啶 荧光定量聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 分析与检测
• 页码范围: 244-252
• 页数: 9页
• 字数: 5395字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2020.07.030

摘要

为建立准确定量速冻面米制品中金黄色葡萄球菌活菌,筛查肠毒素sea基因并指示PCR反应假阴性的三重PMA-qPCR检测方法.针对金黄色葡萄球菌特异靶基因RpiR和肠毒素基因sea序列保守区,设计引物、探针和构建扩增内标,优化建立三重qPCR检测体系,建立PMA食品前处理方法去除死菌DNA,构建纯培养物和速冻面米制品中污染金黄色葡萄球菌的定量标准曲线,应用三重PMA-qPCR方法检测人工污染金黄色葡萄球菌的速冻面米制品.采用GB4789.10-2016中规定的选择平板计数法,评价三重PMA-qPCR方法的检测性能.结果表明,三重PMA-qPCR检测体系扩增效率高,特异性好.当食品中金黄色葡萄球菌污染量大于103 CFU/g时,靶基因RpiR可获得有效扩增,污染量在103～107 CFU/g之间时,扩增曲线线性良好(R2=0.994),PMA-qPCR定量结果与平板计数结果一致性较好.当sea阳性菌株污染量大于103 CFU/g时,应用PMA-qPCR方法可有效评估食品污染肠毒素A的风险.综上所述,本研究建立的三重PMA-qPCR检测方法操作简便,可快速定量检测速冻面米制品中金黄色葡萄球菌,评估食品污染肠毒素A的风险.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施春雷	上海交通大学农业与生物学院	34	227	8.0	14.0
2	史贤明	上海交通大学农业与生物学院	48	641	16.0	24.0
3	杨美成		60	268	8.0	13.0
4	李琼琼		8	47	4.0	6.0
5	宋明辉		5	4	1.0	2.0