高迁移率族蛋白1在醛固酮诱导肾小管上皮细胞自噬中的作用

• 作者: 周琬秋 林定彪 毛楠 王少清 陈鸿禧 马欣
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 高迁移率族蛋白质类 醛固酮 自噬 慢性肾脏病 肾小管上皮细胞
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 248-252
• 页数: 5页
• 分类号: R692
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20191827

摘要

目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)在醛固酮(ALDO)诱导大鼠肾小管上皮细胞自噬中的作用.方法 取对数生长期的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),分为Control组、ALDO组(10 nmol/L)、HMGB1抗体组(1 mg/L)、IgG组(1 mg/L)和ALDO+HMGB1抗体组(1 mg/L HMGB1抗体预处理1 h,再加入10 nmol/L ALDO刺激24 h)和阳性对照组(Rosup,100μmol/L),处理24 h后利用荧光探针DCFH-DA标记后使用流式细胞仪检测NRK-52E细胞内活性氧(ROS)水平的变化.另外,将培养的NRK-52E细胞分为Control组、ALDO组(10 nmol/L)、N-乙酰半胱氨酸组(NAC,50μmol/L)和NAC+ALDO组(50μmol/L NAC预处理1 h,再加入10 nmol/L ALDO),处理24 h后Western blot法检测白细胞介素(IL)-1β蛋白的表达水平.观察10 nmol/L ALDO刺激24 h后,HMGB1蛋白表达的变化.最后,予以1 mg/L HMGB1抗体预处理(1 mg/L HMGB1抗体处理1 h后,再加入10 nmol/L ALDO刺激24 h),Western blot法检测LC3-Ⅱ、Beclin-1和p62蛋白的表达水平.结果 流式细胞仪检测结果显示,与Control组相比,ALDO组NRK-52E细胞内ROS的产生明显增加(P<0.05);与ALDO组相比,ALDO+HMGB1抗体组细胞内ROS的水平显著下降(P<0.05).Western blot结果显示,与Control组相比,ALDO组IL-1β、HMGB1、LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白的表达上调,p62蛋白的表达下调(P<0.05);与ALDO组相比,ALDO+NAC组IL-1β蛋白的表达下调(P<0.05),ALDO+HMGB1抗体组LC3-Ⅱ蛋白的表达降低、p62蛋白的表达增加(P<0.05),Beclin-1蛋白的表达差异无统计学意义.结论 ALDO通过促进NRK-52E细胞内ROS的产生,增加HMGB1的分泌,刺激IL-1β的释放,进而诱导自噬的发生;抑制HMGB1的释放可逆转这一现象,本研究为慢性肾脏病的防治提供了新靶点和新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林定彪	成都医学院生物科学与技术学院生物医学系	2	1	1.0	1.0
2	王少清	成都医学院第一附属医院肾脏内科	70	277	8.0	14.0
3	毛楠	成都医学院第一附属医院肾脏内科	22	66	5.0	7.0
4	马欣	成都医学院第一附属医院肾脏内科	9	13	2.0	3.0
5	陈鸿禧	成都医学院第一附属医院肾脏内科	1	0	0.0	0.0
6	周琬秋	成都医学院第一附属医院肾脏内科	1	0	0.0	0.0