CRISPR/Cas 9系统构建敲除FN表达的卵巢癌稳定表达细胞系研究

• 作者: 刘亚珊 刘运德 李雪 程优 邵艳宏 霍茜瑜 鲍会静
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 纤维连接蛋白 基因敲除技术 CRISPR/Cas 9
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 1737-1741,1745
• 页数: 6页
• 分类号: R711
• 字数: 4083字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2020.11.004

摘要

目的 利用CRISPR/Cas 9系统在人卵巢癌细胞系OVCAR3中构建敲除纤维连接蛋白(FN)表达的稳定表达细胞系.方法 检测4株卵巢癌细胞系FN表达情况.使用E-CRISP网站设计针对FN基因的向导RNA(sgRNA)序列,将序列连接到lenti-CRISPR-V2质粒后转染高表达FN的OVCAR3细胞.鉴定构建的细胞系FN表达情况.结果 在4株细胞系中选择高表达FN的OVCAR3细胞转入测序结果正确的lenti-CRISPR-V2-FN-sgRNA重组质粒,q-PCR和Western blot方法验证结果显示,其成功降低了卵巢癌OVCAR3细胞的FN的表达水平.结论 CRISPR/Cas 9系统能建立敲除FN表达的卵巢癌稳定表达细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘运德	天津医科大学医学技术学院	80	394	11.0	17.0
2	李雪	天津医科大学医学技术学院	26	121	7.0	10.0
3	霍茜瑜	天津医科大学医学技术学院	3	3	1.0	1.0
4	鲍会静	天津市南开医院精准整合医学实验室	3	0	0.0	0.0
5	邵艳宏	天津医科大学医学技术学院	1	0	0.0	0.0
6	程优		1	0	0.0	0.0
7	刘亚珊	天津医科大学医学技术学院	1	0	0.0	0.0