尿酸酶在大肠杆菌高密度表达的工艺优化

• 作者: 刘忠 张贵民 马鲁南
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 重组尿酸酶 诱导表达 发酵培养 蛋白表达量
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 开发与应用
• 页码范围: 94-97,103
• 页数: 5页
• 分类号: R91
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2020.01.0016

摘要

[目的]利用大肠杆菌高密度表达尿酸酶进行发酵培养,预构建一种高效、低成本生产尿酸酶的工艺路线.[方法]构建重组尿酸酶大肠杆菌体系,活化种子液,设计不同的接种量、培养温度,绘制生长曲线;种子液接种至不同pH值的培养基中进行诱导表达;种子液中加入不同浓度的IPTG诱导剂.[结果]10％的接种量细胞的OD600为3.348;菌体在37℃的培养环境下OD600达到3.8.培养基的初始pH值在7.5时,尿酸酶的表达量达到25％以上.种子液加入0.8 mmol/L的IPTG后,尿酸酶的表达量超过40％,持续培养6h后,菌体OD600为2.9.[结论]与之前工艺对比,经过工艺优化之后,尿酸酶的表达量增超过25％,大肠杆菌的OD600达到3.0左右.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘忠		7	3	1.0	1.0
2	张贵民		16	2	1.0	1.0
3	马鲁南		1	0	0.0	0.0