基于重组毕赤酵母的鳜鱼β-防御素生物合成及其抑菌活性

• 作者: 吕星星 王莎莎 谢晶 赵震 钱韻芳 陶妍
• 来源期刊: 上海海洋大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 毕赤酵母 重组表达 鳜鱼 β-防御素 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 水产微生物
• 页码范围: 568-577
• 页数: 10页
• 分类号: S917.1|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.12024/jsou.20191002824

摘要

鳜鱼 β-防御素(Siniperca chuatsiβ-defensin,ScBD)多肽链由N端的信号肽和C端的成熟肽组成,通过构建产鳜鱼 β-防御素的毕赤酵母重组菌株,以解决天然免疫小分子抗菌肽的来源问题.通过RT-PCR从鳜鱼脾脏中分离编码 β-防御素成熟肽的基因ScBD,将其与表达载体pPICZαA连接后构建重组表达载体pPICZαA-ScBD并转入毕赤酵母X-33;通过含高浓度博来霉素的YPD平板筛选阳性转化子后,于28℃ 、250 r/min和pH 6.0的条件下,使用1％ 甲醇诱导表达96 h;经镍离子亲和层析对重组毕赤酵母菌株的产物进行纯化,并对纯化产物进行MALDI-TOF/TOF质谱鉴定;通过平板涂布法和浊度法检测该重组菌株产物的抑菌活性.结果表明:基于质谱分析的一级结构鉴定证明纯化产物为分子量6.35 ku的预期重组ScBD;抑菌实验显示重组菌株产物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)的抑制率分别为94.34％ 、86.97％ 和85.92％.本文构建的重组毕赤酵母菌株能有效合成具有生物学活性的重组ScBD,为鱼类来源天然小分子抗菌肽的进一步开发提供了技术途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢晶	上海海洋大学食品学院	124	1650	23.0	32.0
5	陶妍	上海海洋大学食品学院	34	379	6.0	19.0
9	吕星星	上海海洋大学食品学院	3	0	0.0	0.0
10	王莎莎	上海海洋大学食品学院	3	0	0.0	0.0
11	赵震	上海海洋大学食品学院	3	0	0.0	0.0