玉米质体型淀粉磷酸化酶抗体的制备

• 作者: 何姗 余国武 吴楠 申蕾阳 青芸 黄玉碧
• 来源期刊: 玉米科学
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米 淀粉磷酸化酶 载体构建 蛋白纯化 抗体制备
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 生理生化·耕作栽培
• 页码范围: 104-110
• 页数: 7页
• 分类号: S513.01
• 语种: 中文
• DOI: 10.13597/j.cnki.maize.science.20200116

摘要

通过同源基因基因克隆、原核表达载体构建、GST融合蛋白诱导表达与纯化、新西兰大白兔免疫、抗血清分离和纯化制备了SPI多克隆抗体,并进行了玉米体内蛋白Western blot验证.结果 表明,成功构建的PGEX-6T-1-SPI-C表达载体在大肠杆菌中表达并纯化了GST-SPI-C融合蛋白,通过免疫新西兰大白兔制备并纯化了SPI多克隆抗体.制备的SPI多克隆抗体不但能识别GST-SPI-C融合蛋白,而且能识别玉米体内全长SPI蛋白(112 kD),并具有较好的特异性.玉米子粒和胚乳的Western blot检测表明,SPI蛋白主要积累在胚乳中,与mRNA定量结果一致.