鲤疱疹病毒3型ORF148 DNA疫苗对建鲤鱼苗的免疫保护

• 作者: 冯国清 刘振兴 吴静 李玉谷 柯浩 梁志凌 郝乐 马江耀 马艳平
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鲤疱疹病毒3型 ORF148 DNA疫苗 ELISA RT-qPCR
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 454-462
• 页数: 9页
• 分类号: S94
• 字数: 4904字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2020.19212

摘要

鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3)又称为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV),是一种高传染性、致死性病毒.为开发新型CyHV-3 DNA疫苗,前期研究中将CyHV-3 ORF148基因插入pEGFP-N1构建重组质粒,在此基础上,本研究通过转染试验、间接免疫荧光试验证实pORF148-EGFP融合蛋白可以在CCB-J细胞系和建鲤体内表达;将重组质粒作为DNA疫苗,肌肉注射免疫建鲤鱼苗,ELISA检测表明免疫pEGFP-ORF148重组质粒可以显著提高建鲤血清特异性抗体水平;RT-qPCR检测显示,免疫pEGFP-ORF148重组质粒后,建鲤脾脏和头肾中的免疫相关基因如IFN-a1、Mx-1、CXCa、CXCR1、TNF-α、IL-1β及IgM基因表达量均显著提高.攻毒实验显示,CyHV-3攻毒21 d后,PBS组、pEGFP-N1组和pEGFP-ORF148组的建鲤存活率分别为30％、35％和85％,免疫pEGFP-ORF148可以显著提高建鲤的存活率(P<0.01).本研究旨在为CyHV-3 DNA疫苗的应用提供理论依据.