下调UHRF1表达对食管鳞癌Eca-109细胞放射敏感性的影响

• 作者: 孙宇晨 张晓智 惠蓓娜 车少敏 龚拓拓
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 食管癌 UHRF1 shRNA 放射敏感性
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 525-529
• 页数: 5页
• 分类号: R735.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb202004011

摘要

目的 研究下调UHRF1对食管鳞癌Eca-109细胞放射敏感性的影响,并对其作用机制进行探讨.方法 以人UHRF1基因为靶标设计shRNA序列,慢病毒介导将UHRF1-shRNA转染至Eca-109细胞,qRT-PCR及Western blotting测定转染前后UHRF1 mRNA及蛋白的表达;克隆形成实验评估UHRF1沉默后Eca-109细胞放射敏感性的改变;流式细胞术检测沉默UHRF1对X线照射前后Eca-109细胞凋亡影响;Western blotting检测下调UHRF1、X线照射前后Eca-109细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase-3及AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响.结果 成功构建了UHRF1表达稳定下调的Eca-109 shUHRF1细胞系;克隆形成实验显示,UHRF1表达下调后Eca-109细胞的放射敏感性提高;流式细胞术分析显示,shUHRF1组凋亡细胞的比例较NC组增加,而照射后这种趋势更加明显;Western blotting检测显示,与NC组相比,shUHRF1组凋亡抑制蛋白Bcl-2表达量下降,凋亡蛋白Active caspase-3表达量升高,AKT/mTOR信号通路关键分子p-AKT、p-mTOR蛋白表达量下降,而6 Gy X线照射后,Bcl-2、Active caspase-3、p-AKT、p-mTOR蛋白变化较照射前更为明显.结论 沉默UHRF1可以增加食管癌Eca-109细胞的放射敏感性,其机制与减弱AKT/mTOR信号通路传导活性及诱导凋亡有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张晓智	西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科	74	340	11.0	15.0
2	车少敏	西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科	30	165	6.0	12.0
3	惠蓓娜	西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科	9	28	3.0	5.0
4	孙宇晨	西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科	5	0	0.0	0.0
5	龚拓拓	西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科	2	0	0.0	0.0