miR-200c-3p靶向XIAP调控缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡

• 作者: 厉广洲 张丽丽 徐继蕊
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-200c-3p XIAP 心肌细胞 凋亡 缺氧复氧
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 572-577
• 页数: 6页
• 分类号: R542.2
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨miR-200c-3p对缺氧复氧心肌细胞凋亡的影响及作用机制.方法 构建缺氧复氧(H/R)H9c2细胞.运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中miR-200c-3p、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)信使核糖核酸(mRNA)的表达.将H9c2细胞分为H/R+ anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、H/R+ anti-miR-200c-3p组(转染anti-miR-200c-3p)、H/R+ pcDNA组(转染pcDNA)、H/R+ pcDNA-XIAP组(转染pcDNA-XIAP)、H/R+anti-miR-200c-3p+si-NC组(共转染anti-miR-200c-3p和si-NC)、H/R+anti-miR-200c-3p+si-XIAP组(共转染anti-miR-200c-3p和si-XIAP),用脂质体法转染至H9c2细胞,再进行缺氧复氧处理.免疫印迹(Western blot)、噻唑蓝(MTT)、流式细胞术检测细胞中XIAP、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspaase-3)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病2X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)的表达、细胞增殖、细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-200c-3p与XIAP的结合力.结果 成功构建缺氧复氧H9c2细胞;与正常培养的H9c2细胞比较,H/R组H9c2细胞中miR-200c-3p表达明显上调,XIAP表达明显下调;抑制miR-200c-3p、过表达XIAP均可抑制H/R H9c2细胞的凋亡,下调cleaved Caspase-3、Bax,上调Bcl-2;miR-200c-3p可显著抑制XIAP 3'UTR野生型报告基因活性,并负向调控XIAP的表达;敲减XIAP可逆转抑制miR-200c-3p对H/R H9c2细胞的凋亡抑制作用.结论 miR-200c-3p可诱导缺氧复氧心肌细胞的凋亡,其机制与靶向XIAP有关,可为心血管疾病的治疗提供新靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丽丽	枣庄矿业集团枣庄医院心血管内科	2	0	0.0	0.0
2	厉广洲	日照心脏病医院心血管内科	1	0	0.0	0.0
3	徐继蕊	枣庄矿业集团枣庄医院心血管内科	1	0	0.0	0.0