miR-181a靶向SIRT1对脓毒症诱导的小鼠急性肺损伤的影响及作用机制

• 作者: 伍长学 姜启栋 张雪梅 曹蓓 李渊 梅松涛
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 急性肺损伤 脓毒症 沉默信号调控因子1(SIRT1) miR-181a
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 516-524
• 页数: 9页
• 分类号: R459.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb202004010

摘要

目的 探究miR-181a通过靶向沉默信号调控因子1(SIRT1)对脓毒症诱导的小鼠急性肺损伤的影响及作用机制.方法 脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤A549细胞模型,并通过miR-181a inhibitor和inhibitor阴性对照(NC)转染细胞;盲肠结扎穿孔术法(CLP)建立小鼠脓毒症急性肺损伤模型,并通过miR-181a antagomir和antagomir NC静脉注射,检测生存率、肺湿重/干重比.荧光素酶报告实验检测miR-181a和SIRT1靶向关系.RT-PCR检测miR-181a、SIRT1在体内体外的基因表达,Western blotting检测SIRT1在体内体外的蛋白水平,以及凋亡标志物蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bax及活化半胱天冬酶3(cl-CASP3)在体内蛋白水平,流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8检测体外细胞活力,试剂盒检测CASP3体外活性,HE染色检测肺组织病理变化,TUNNEL染色检测体内细胞凋亡,ELISA检测体内血清炎症细胞因子水平.结果 在细胞实验中,与Control组比较,LPS组细胞中miR-181a表达升高,SIRT1表达降低(P<0.01),同时细胞凋亡率升高,CASP3活性升高,细胞活力下降;miR-181a inhibitor可扭转上述各指标的改变(P<0.01);在动物实验中,与Sham组比较,CLP组小鼠生存率下降,肺湿重/干重比上升,出现明显的病理性改变及细胞凋亡,同时炎症细胞因子水平升高,组织内miR-181a、Bax、cl-CASP3蛋白水平升高,SIRT1、Bcl-2蛋白水平降低(P<0.01),经过miR-181a antagomir处理可扭转上述各指标的改变(P<0.05,P<0.01).结论 miR-181a可靶向作用于SIRT1,抑制miR-181a表达可提高SIRT1表达,从而对脓毒症诱导的小鼠急性肺损伤起保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	伍长学	西南医科大学附属医院重症医学科	6	5	1.0	2.0
2	李渊	西南医科大学附属医院重症医学科	7	6	1.0	2.0
3	姜启栋	西南医科大学附属医院重症医学科	1	0	0.0	0.0
4	梅松涛	西南医科大学附属医院重症医学科	1	0	0.0	0.0
5	曹蓓	西南医科大学附属医院重症医学科	1	0	0.0	0.0