银杏二萜内酯葡胺注射液通过调控炎症和凋亡信号通路减轻OGD/R诱导的细胞损伤

• 作者: 杨阳 洪倩 王增慧 闫兆 高璐
• 来源期刊: 中国药学（英文版）
• 学科: 医学
• 关键词: 银杏内酯 BV2神经小胶质细胞 TLR 脑缺血 NF-κB MAPK 炎症
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 455-469
• 页数: 15页
• 分类号: R966
• 语种: 英文

摘要

银杏二萜内酯葡胺注射液(DGMI)是一种银杏叶提取物注射液,目前用于缺血性中风恢复期的治疗.在本研究中,我们旨在证实DGMI是否可以抑制炎症反应和细胞凋亡,并探讨这些作用的潜在机制.将细胞暴露于氧-糖剥夺/复氧(OGD/R)后,通过MTS和LDH测定法测量细胞活力和乳酸脱氢酶(LDH)释放量.使用Annexin V-FITC/PI双重染色分析试剂盒通过流式细胞仪检测了DGMI的抗凋亡作用.通过特定的Bio-Plex ProTM剂盒对包括TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10在内的促炎性细胞因子进行定量检测.此外,分别通过蛋白质印迹分析和免疫荧光染色测定TLR2/4, NF-κB p65,MAPK通路激活和凋亡相关蛋白的活性以及NF-κB p65的细胞定位.结果 显示,50 μg/mL的DGMI在OGD/R诱导的BV2小胶质细胞中显著提高了细胞活力并降低了IL-1β,IL-6,IL-10和TNF-α的分泌.通过LDH测定和Annexin V-FITC/PI染色也证实了这些作用.同时,DGMI不仅抑制TLR2,TLR4,MyD88,p-TAK1,p-IkBk,p-IKKK和Bak的蛋白表达,且降低了OGD/R诱导的BV2小胶质细胞中C-caspase-3/caspase-3,Bax/Bcl-2和C-PARP-1/PARP-1的比率.此外,DGMI还部分抑制了OGD/R增强的p-JNK1/2和p-p38 MAPK表达以及NF-κB p65的核移位.本研究表明,OGD/R激活的BV2小胶质细胞中触发了炎症反应,导致促炎细胞因子的释放和细胞凋亡.DGMI通过调节TLR/MyD88/NF-κB信号通路以及下调p-JNK1/2和p-p38 MAPK激活来抑制炎症反应和细胞凋亡.