双氢睾酮浓度波动对前列腺上皮细胞中错配修复基因表达的影响及其机制

• 作者: 万远烨 崔飞伦 张小飞 徐旭 胡建鹏 薛博
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 双氢睾酮浓度波动 细胞增殖 错配修复 雄激素受体信号通路 蛋白激酶B信号通路
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 97-100
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2020.01.028

摘要

目的 探讨双氢睾酮(DHT)浓度波动对前列腺上皮细胞(RWPE-2细胞系)中错配修复基因MutL同源物(MLH1)表达的影响及其机制.方法 将RWPE-2细胞分为空白组,恒定组(DHT浓度为1、10 nmol/L)以及波动组(DHT浓度为1、10 nmol/L,每24h波动1次),以不同浓度的DHT干预不同的时间(0、24、48、72 h),观察细胞的形态、生长状态及细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力;应用蛋白质印迹法(Western blot)、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测雄激素受体(AR)信号通路靶基因[前列腺特异抗原(PSA)、FK506结合蛋白(FKBP5)]、苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路靶基因[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)]和MLH1基因表达的改变;免疫荧光法检测基因分布位置的变化.应用Graph Pad 7.0统计软件分析,组间差异采用t检验分析.结果 恒定组与波动组中RWPE-2细胞形态学变化与DHT作用具有浓度(1～10 nmol/L)依赖性;CCK-8结果提示,72 h后,与空白组(6.904±0.143)比较,恒定组(7.073±0.103)、(8.508±0.187)与波动组(8.662±0.327)、(9.239±0.167)相对吸光度(A)值均增加,提示DHT干预增强细胞增殖,呈时间浓度依赖性(1～10 nmol/L),差异有统计学意义(=6.805、4.922、10.6,P＜0.01);Western blot结果提示,与空白组比较,波动组与恒定组中各靶基因的mRNA及蛋白表达水平均上调,波动组较恒定组中上述基因表达进一步上调,波动组FKBP5基因较恒定组表达下调,差异有统计学意义(t=5.488、15.730、7.976、3.695、3.952、2.830,P＜0.05);免疫荧光结果显示,与空白组比较,波动组和恒定组中各靶基因核内分布增多,且波动组上述基因分布差异更显著.结论 DHT能上调RWPE-2细胞中错配修复基因MLH1的表达,而DHT波动会使这种趋势增加,通过AR和Akt信号通路介导的细胞增殖是其可能机制之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔飞伦	江苏大学附属人民医院泌尿外科	34	76	5.0	7.0
2	胡建鹏	江苏大学附属人民医院泌尿外科	13	18	2.0	3.0
3	薛博	江苏大学附属人民医院泌尿外科	2	0	0.0	0.0
4	张小飞	江苏大学附属人民医院泌尿外科	4	0	0.0	0.0
5	万远烨	江苏大学附属人民医院泌尿外科	2	0	0.0	0.0
6	徐旭	江苏大学附属人民医院泌尿外科	4	6	1.0	2.0