基于质粒分子的转cry1Aa基因棉花定量PCR方法的建立

• 作者: 苏长青
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 抗虫棉 质粒分子 acp1基因 cry1Aa基因 品系特异性实时PCR
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 作物科学
• 页码范围: 569-575
• 页数: 7页
• 分类号: S562
• 字数: 4008字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2020.06.001

摘要

[目的]转cry1Aa基因棉花南农6号为我国未经批准商业化种植的棉花品种.为监测其非法种植,解决阳性标准品不容易获得的问题,构建适合转cry1Aa基因棉花南农6号品系特异性检测的质粒分子pMD-NN6,以该质粒分子作为标准物质,建立相应的实时荧光定量PCR方法.[方法]根据南农6号转化体特异序列和棉花内标准基因acp1设计引物,采用重叠PCR方法构建质粒分子;以质粒分子作为标准物质,南农6号转化体特异序列为靶标,建立了南农6号棉花特异性定量检测方法.[结果]构建的质粒全长为3148 bp,含有南农6号品系特异性序列和棉花acp1基因序列两个靶标片段的质粒分子,定量标准曲线斜率和扩增效率均符合要求,定量检测限为30拷贝.两个已知南农6号含量的混合样品(2.0％ 和0.5％)定量检测的准确度标准偏差均在±25％ 范围内,精确度相对标准差均≤25％.[结论]建立的PCR定量检测方法可以用于含有南农6号转基因棉花产品的品系特异性定量检测,所构建的标准质粒pMD-NN6可以代替其基因组DNA作为标准物质使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏长青	衡水学院生命科学系	17	193	6.0	13.0