miR-301a-3p对大鼠星形胶质细胞Cx43转录后的靶向调控作用

• 作者: 关静 张燕 李林 杜开先 王军 董燕 贾天明 陈豪
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 缝隙连接蛋白43 微小RNA-301a-3p 星形胶质细胞
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 501-506
• 页数: 6页
• 分类号: R741|R363
• 字数: 4665字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2020.03.018

摘要

目的:研究大鼠星形胶质细胞中微小RNA-301a-3p(miR-301a-3p)对缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的靶向调控作用及其作用位点.方法:合成miR-301a-3p agomir和miR-301a-3p antagomir,转染至星形胶质细胞,Western blot检测各组细胞中Cx43蛋白的表达情况;构建重组载体wt-pEZX-MT05-Cx43和mut-pEZX-MT05-Cx43,采用双萤光素酶报告基因实验验证miR-301a-3p的靶基因;构建表达载体pcDNA3.1-Cx43,通过回复实验分析miR-301a-3p对细胞凋亡的影响.结果:将miR-301a-3p agomir转染到星形胶质细胞后,Western blot检测显示,与对照组相比,Cx43蛋白表达显著降低(P<0.05).双萤光素酶报告基因实验结果表明,miR-301a-3p能够与Cx43的3'-UTR结合,对其表达产生负调控;将不含Cx433'-UTR的重组载体pcDNA3.1-Cx43转染星形胶质细胞后,能够回复miR-301a-3p对Cx43蛋白表达的负调控作用,引起细胞凋亡.结论:Cx43是miR-301a-3p的一个靶基因,miR-301a-3p通过作用于Cx43 mRNA的3'-UTR而抑制其在大鼠星形胶质细胞中的表达.