建立靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统及其应用

• 作者: 吴洁莹 吴韶清 孙逊沙 李发涛 李焱 谢闺娥 陈劲松
• 来源期刊: 广州医药
• 关键词: CRISPR/Cas9技术 基因编辑 CXCR7
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8535.2020.05.004

摘要

目的 构建靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,并应用于HEK 293T细胞系.方法 设计两对靶向CXCR7基因的sgRNAs,分别插入PX458载体中,并转化DH5α大肠埃希菌.经菌液PCR和测序验证,挑选序列正确的sgRNA-CXCR7-PX458质粒,转染HEK 293T细胞,用流式分选转染阳性细胞,提取其DNA,PCR扩增后测序验证.结果 经测序验证,成功构建了靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9系统,转染HEK 293T细胞后,测序鉴定发现成功编辑CXCR7基因.结论 成功构建了靶向CXCR7的sgRNA-CXCR7-PX458质粒,可在HEK 293T上成功编辑CXCR7基因,为进一步的功能研究奠定基础.