紫檀芪在草酸诱导HK-2细胞内质网应激和凋亡中的作用

• 作者: 何子奇 刘俊炜 刘浪 宋钱林 李彬 杨嗣星
• 来源期刊: 中华泌尿外科杂志
• 关键词: 草酸 紫檀芪 内质网应激 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 540-547
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112330-20200401-00250

摘要

目的 探讨紫檀芪在草酸诱导人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)发生内质网应激和凋亡的作用.方法 2019年1月至2020年1月,取HK-2细胞分为对照组(基础培养基培养)、草酸组(含4 mmol/L草酸的基础培养基培养)、紫檀芪干预组(含草酸4 mmol/L+紫檀芪5、10、20μmol/L的混合培养基共同培养),3组细胞培养12 h后进行如下实验.CCK-8实验检测细胞活力,检测乳酸脱氢酶及抗氧化能力相关指标(还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、丙二醛、过氧化氢酶、总抗氧能力);蛋白质印迹法检测细胞内ATF6、GRP78、DDIT3、caspase12和裂解的caspase3/9的蛋白表达情况.3组在进行下述实验时,紫檀芪干预组中仅用紫檀芪浓度10 μmol/L:检测线粒体膜电位、caspase3酶活性、细胞凋亡率、活性氧水平,实时荧光定量PCR检测细胞内ATF6、GRP78、DDIT3的mRNA表达情况.结果 CCK-8实验和及乳酸脱氢酶检测结果显示,草酸组较对照组的细胞活力[(45.6±3.1)％与100.0％,P＜0.001]明显下降,乳酸脱氢酶[(330.2±11.1)U/L与(92.6±6.7)U/L,P＜0.001]明显上升;紫檀芪干预组(5、10、20 μmol/L)的细胞活力[(57.2±1.7)％、(67.2±3.4)％、(78.9±1.8)％]较草酸组均明显上升(均P＜0.05),乳酸脱氢酶[(288.1±4.3) U/L、(260.9±5.5) U/L、(202.6±10.2) U/L]较草酸组均明显下降(均P＜0.05).丙二醛、还原型谷胱甘肽、总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、总抗氧能力五项生化指标检测结果显示的细胞损伤状态与CCK-8和乳酸脱氢酶实验结果一致.活性氧检测结果显示,草酸组较对照组的活性氧水平(76.3±4.9与6.2±1.7,P＜0.01)明显上升;紫檀芪干预组(10 μmol/L)的活性氧水平(39.5±5.4)较草酸组明显下降(P＜0.01),流式细胞术和caspase3酶活性检测结果显示3组细胞凋亡率和caspase3活性的上升趋势与活性氧水平变化趋势一致.线粒体膜电位结果显示,草酸组较对照组的线粒体膜电位(0.76±0.15与7.84±0.26,P＜0.01)明显下降,紫檀芪干预组(10μmol/L)的线粒体膜电位(2.26±0.27)较草酸组明显上升(P＜0.01).蛋白质印迹法检测结果显示,草酸组较对照组的ATF6、DDIT3、GRP78、caspase12和裂解的caspase3/9的蛋白相对表达量显著上升(均P＜0.05);紫檀芪干预组(5、10、20μmol/L)较草酸组的ATF6、DDIT3、GRP78、caspase12、裂解的caspase3/9的蛋白相对表达量显著下降(均P ＜0.05).实时荧光定量PCR结果显示3组ATF6、DDIT3和GRP78的mRNA表达趋势与蛋白质印迹法结果一致.结论 紫檀芪可以有效抑制草酸诱导的HK-2细胞发生内质网应激和凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨嗣星	武汉大学人民医院泌尿外科	139	934	16.0	23.0
2	李彬	武汉大学人民医院泌尿外科	25	85	5.0	8.0
3	宋钱林	武汉大学人民医院泌尿外科	2	0	0.0	0.0
4	何子奇	武汉大学人民医院泌尿外科	2	0	0.0	0.0
5	刘俊炜	武汉大学人民医院泌尿外科	1	0	0.0	0.0
6	刘浪	武汉大学人民医院泌尿外科	5	32	3.0	5.0