无选择标记转基因大白菜的检测

• 作者: 佟容 于占东 吴春燕 乔宏宇 乔建磊 王彧彧 张新影
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 无选择标记转基因 ELSIA PCR-Southern RT-PCR 大白菜
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 页码范围: 364-369
• 页数: 6页
• 分类号: S634.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2019.4815

摘要

通过对转基因大白菜进行TuMV-C4病毒摩擦接种鉴定、ELSIA检测、提取转基因大白菜DNA进行PCR检测,并通过PCR-Southern杂交、RT-PCR检测转基因大白菜,构建了针对无选择标记转基因大白菜的系统检测方法.试验结果表明:转基因大白菜通过摩擦接种TuMV-C4病毒抗病性鉴定,188株表现为抗性,初步筛选率为19.46％;进行ELISA检测抗病植株中TuMV含量,有63株明显低于非转化植株,筛选率达到26.25％;对抗TuMV植株直接进行目的基因PCR检测,有25株呈阳性,筛选率达到13.30％.经PCR-South-em杂交检测和RT-PCR检测,表明转基因大白菜中不仅整合了Nib基因,而且获得了表达.这种逐级递进的检测系统可以高效地获得无选择标记的转基因植株.