微小RNA-378a对皮肤鳞癌细胞侵袭、迁移和CD226表达的影响

• 作者: 李灵 杨洲 王新月
• 来源期刊: 临床肿瘤学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 皮肤鳞状细胞癌(CSCC) 微小RNA-378a(miR-378a) 侵袭 迁移 CD226
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: R739.5
• 字数: 4147字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0460.2020.01.001

摘要

目的 探讨微小RNA-378a(miR-378a)对皮肤鳞癌(CSCC)细胞侵袭、迁移和CD226表达的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测CSCC细胞A431和人角质形成细胞HaCaT的miR-378a水平;将体外常规培养的A431细胞进行转染,根据转染物不同分为增强转染组(转染miR-378a mimics)、抑制转染组(转染miR-378a inhibitor)和空白转染组(无转染).采用QPCR、活细胞计数( CCK)-8、Annexin V-FITC／PI 双染流式细胞术、 Transwell 细胞迁移和侵袭实验以及Western blotting检测miR-378a水平、增殖活力、凋亡率、穿膜细胞数和CD226水平;构建荧光素酶报告质粒psiCHECK-2,并采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-378a与CD226基因的靶向关系.结果 与HaCaT细胞(1. 089±0. 197)相比,A431细胞的miR-378a水平升高至4. 435±0. 807(P＜0. 05).与空白转染组的1. 031± 0. 173相比,增强转染组的miR-378a水平升高至11. 846±2. 179,而抑制转染组则降低至0. 162±0. 040;与空白转染组相比,增强转染组转染48、72 h后的增殖活力升高,而抑制转染组则降低;与空白转染组的(7. 464±1. 281)%相比,增强转染组的凋亡率降低至(3. 799±1. 279)%,而抑制转染组则升高至(15. 435±2. 112)%;细胞侵袭实验中,与空白转染组的(62. 704±5. 639)个相比,增强转染组的穿膜细胞数升高至(89. 401± 6. 358)个,而抑制转染组则降低至(17. 346±2. 954)个;细胞迁移实验中,与空白转染组的(84. 227±5. 478)个相比,增强转染组的穿膜细胞数升高至(102. 139±7. 930)个,而抑制转染组则降低至(54. 448±13. 068)个;与空白转染组的0. 428±0. 033相比,增强转染组的CD226水平降低至0. 173±0. 056,而抑制转染组则升高至0. 695±0. 020.以上组间差异均有统计学意义( P＜0. 05). miR-378a mimics和携带CD226野生型3'端非翻译区(3'UTR)质粒共转染时,荧光素酶活性显著下降( P＜0. 05);而当miR-378a mimics与携带CD226突变型3'UTR质粒共转染时,荧光素酶活性无显著变化( P＞0. 05).结论 CSCC细胞中miR-378a高表达并发挥促癌作用,下调该miRNA水平可抑制CSCC细胞增殖、迁移和侵袭能力并诱导凋亡,可能通过靶向CD226来发挥促癌作用,在CSCC靶向治疗中有一定的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李灵	四川省医学科学院四川省人民医院皮肤性病科	12	2	1.0	1.0
2	杨洲	四川省医学科学院四川省人民医院皮肤性病科	5	5	2.0	2.0
3	王新月	四川省医学科学院四川省人民医院皮肤性病研究所	1	0	0.0	0.0