塞内卡病毒AVP1基因原核表达及蛋白纯化

• 作者: 王德 贺大芳 邱文英 邹瑶 陈奕帆
• 来源期刊: 养猪
• 学科: 农学
• 关键词: 塞内卡病毒 VP1基因 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 猪病防制与保健
• 页码范围: 98-101
• 页数: 4页
• 分类号: S858.285.1
• 字数: 3368字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1957.2020.01.044

摘要

试验以猪塞内卡病毒A(SVA)VP1基因为研究对象,利用基因重组技术构建原核表达载体pET-28a(+)-VP1.重组质粒转化E. coli BL21(DE3)后经1 mmol/L异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在37℃条件下诱导6 h,后经15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳进行检测.结果:SVAVP1基因能在BL21(DE3)中成功表达,融合蛋白相对分子质量约36 kDa;表达的融合蛋白以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在,以包涵体为主要存在形式.以上研究结果为后续SVAVP1蛋白的免疫原性的研究及塞内卡病毒病抗体ELISA方法的建立奠定了基础.