BCR-ABL下游通路抑制剂对人慢性粒细胞白血病细胞的作用及BEZ235逆转伊马替尼耐药的研究

• 作者: 刁勇 刘生全 唐明青 彭群艺 朱雄鹏 李纯团 辛鹏亮
• 来源期刊: 白血病·淋巴瘤
• 关键词: 白血病,髓样,慢性 抗药性,肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 PI3K-AKT-mTOR 伊马替尼
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 206-212
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115356-20191031-00211

摘要

目的 探讨RAF抑制剂SB590885、JAK抑制剂AZD1480、PI3K-mTOR双靶点抑制剂BEZ235等BCR-ABL下游通路抑制剂体外对慢性粒细胞白血病(CML)细胞的作用及BEZ235对CML细胞增殖、凋亡及伊马替尼敏感性的影响.方法 用不同浓度药物处理K562细胞,采用MTS法检测K562细胞的增殖抑制率,计算各药物48 h半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率,流式细胞术PI单染色法检测细胞周期.以不同浓度药物处理K562细胞、伊马替尼耐药的T315I突变的人CML KBM7R细胞、伊马替尼耐药的CML患者原代细胞,采用MTS法检测细胞增殖抑制率,分别计算各药物48 h的IC50.分别单用1.0 μmol/L BEZ235、1.0 μmol/L伊马替尼或两者联合处理KBM7R细胞或CML患者原代细胞,采用流式细胞术PI单染色法检测KBM7R细胞周期,流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染色法检测CML患者原代细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测KBM7R细胞p-AKT、cleaved Caspase-3、Cyclin D1蛋白的表达情况.结果 SB590885、AZD1480、BEZ235均能抑制K562细胞的增殖,三者处理K562细胞48 h的IC5o分别为(11.49±3.14)、(4.83±1.26)、(0.37±0.21)μmol/L.SB590885、AZD1480、BEZ235均能促进K562细胞的凋亡,与未经药物作用的对照组比较,细胞凋亡率均升高(均P＜ 0.01).SB590885和BEZ235诱导细胞Go/G1期阻滞(均P＜0.05),AZD1480诱导细胞G2/M期阻滞(P＜0.05).BEZ235可抑制K562、KBM7R细胞以及患者原代细胞的增殖,其48 h的IC50分别为(0.37±0.21)、(0.43±0.27)、(0.49±0.24) μmol/L.与单用伊马替尼组相比,0.2μmol/LBEZ235与不同浓度伊马替尼联用可增加对K562、KBM7R细胞和患者原代细胞的增殖抑制,降低伊马替尼的IG50,其中,伊马替尼单用和联合BEZ235处理48 h后,K562细胞的伊马替尼IC50分别为(0.14±0.05)、(0.09±0.04) μmol/L(t=1.351,P=0.249),KBM7R细胞分别为(3.93±2.29)、(0.44±0.22)μmol/L(t=2.837,P=0.047),原代细胞分别为(3.12±1.53)、(0.39±0.23) μmol/L(t=3.925,P=0.042).未经药物作用的对照组、单用1.0 μmol/L BEZ235、单用1.0 μmol/L伊马替尼及两药联合处理24 h后患者原代细胞凋亡率分别为(4.9±1.4)％、(13.1±3.2)％、(8.8±2.0)％、(40.6±6.0)％,差异有统计学意义(F=71.031,P＜ 0.01).与单用伊马替尼相比,BEZ235联合伊马替尼处理12h的KBM7R细胞p-AKT、Cyclin D1蛋白的表达降低,cleaved Caspase-3蛋白的表达升高.结论 BCR-ABL下游通路抑制剂可有效抑制K562细胞的增殖,促进细胞凋亡.BEZ235能够抑制K562细胞、伊马替尼耐药的T315I突变的KBM7R细胞以及伊马替尼耐药的CML患者原代细胞的增殖,促进细胞凋亡,与伊马替尼具有协同作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刁勇	华侨大学医学院基础医学系	106	408	11.0	14.0
2	朱雄鹏	福建医科大学附属泉州第一医院血液内科	28	71	5.0	6.0
3	李纯团	福建医科大学附属泉州第一医院血液内科	20	45	4.0	5.0
4	唐明青	华侨大学医学院基础医学系	10	11	2.0	3.0
5	辛鹏亮	福建医科大学附属泉州第一医院血液内科	7	14	2.0	3.0
6	彭群艺	福建医科大学附属泉州第一医院血液内科	1	0	0.0	0.0
7	刘生全	福建医科大学附属泉州第一医院血液内科	1	0	0.0	0.0