大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 吴佳蓓 曹金博 李兆周 李燕虹 王耀 胡骁飞 邓瑞广 邢云瑞 陈秀金
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子 单克隆抗体 免疫学特性
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 分析与检测
• 页码范围: 216-221
• 页数: 6页
• 字数: 2884字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2020.07.026

摘要

为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子(BBI)单克隆抗体(mAb),以50μg/只的免疫剂量将BBI免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA和间接竞争ELISA试验鉴定多抗血清效价和敏感性.选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到分泌BBI mAb的稳定杂交瘤细胞株.采用体内诱生腹水法制备BBI mAb并对其免疫学特性进行鉴定.结果表明:1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为868.58 ng/mL.经细胞融合筛选得到5株杂交瘤细胞,其中3B7-B10 mAb效价达到1:4.096×105以上,亚型为IgG1型,IC50为83.07 ng/mL,具有亲和力较高且特异性强的优点,表明所制备的mAb免疫学特性良好,能够为建立大豆及其制品中BBI的免疫学检测方法提供良好的抗体基础.