大鼠骨骼肌早期死亡时间推断的内参基因筛选

• 作者: 李文灿 王卉 王静致远 田露 肖碧 陈龙 马剑龙 马开军
• 来源期刊: 中国法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医病理学 早期死亡时间 实时荧光定量PCR 内参基因
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 265-268,273
• 页数: 5页
• 分类号: DF795.2
• 字数: 3309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13618/j.issn.1001-5728.2020.03.006

摘要

目的 死亡时间推断是法医病理学实践的重点.运用mRNA定量技术进行死亡时间推断已成为目前研究的热点.在进行mRNA指标挑选时,为了排除其他干扰因素的影响,实验数据必须要经过内参指标的标准化.因此,内参基因的选择对实验结果具有重要影响.方法 SD大鼠颈椎脱臼处死后置于4℃、15℃、25℃、35℃环境温度下,在死后0h、6h、12h、18h、24h五个时间点取骨骼肌组织.利用实时荧光定量PCR技术测定常用内参基因Ct值,并使用三种内参评估软件(geNorm、NormFinder、BestKeeper)综合分析内参稳定性.结论 综合三种内参评估软件结果,在低温条件下,RPS29、RPL13是较合适的内参,而在高温条件下,5SrRNA、18SrRNA是较合适的内参.在35℃时,GAPDH、HPRT、PGK1、UBC、B2M与死亡时间有明显相关性.