环介导等温扩增法检测人粪样中美洲钩虫的方法建立

• 作者: 危芙蓉 朱慧慧 汪俊云 贾孝凯
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 美洲钩虫 环介导等温扩增 虫卵 ITS基因
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 530-533
• 页数: 4页
• 分类号: R383.1
• 字数: 3339字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2020.00.084

摘要

目的 建立一种快速、高效的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测粪样中美洲钩虫虫卵.方法 根据美洲钩虫ITS基因序列,设计4条LAMP引物,建立LAMP检测法.利用LAMP法检测日本血吸虫、肝吸虫、鞭虫、猪蛔虫、蛲虫的DNA样本以验证LAMP方法的特异度.以美洲钩虫成虫DNA样本,倍比稀释以评价LAMP法的DNA最低检出量.现场采集55份人粪DNA样本,采用改良加藤法、LAMP法和普通PCR方法同时检测,评价LAMP法的敏感性和特异性.结果 LAMP法可特异性扩增美洲钩虫DNA样本.LAMP法可检测最低DNA浓度为1.2fg/mL.通过现场样本对LAMP进行评价,LAMP法敏感性相对于改良加藤法和PCR法分别是95.24％和100％.特异性分别是97.06％和100％.结论 建立起以虫卵为检测材料的检测美洲钩虫病的LAMP法,为美洲钩虫病提供特异、敏感、高效的检测方法.