金茵清热口服液对人PBMC中TLR2信号通路的调节机制研究

• 作者: 任攀 刘泽干 孟忠吉 杜士明 沈婷 王敏 雷攀 黄小凤
• 来源期刊: 中国医院药学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 金茵清热口服液 外周血单个核细胞 Toll样2受体 免疫调节
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 53-58
• 页数: 6页
• 分类号: R927.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13286/j.1001-5213.2020.01.07

摘要

目的:研究金茵清热口服液(JYQR)对人外周血单个核细胞(PBMC)中Toll样2受体(TLR2)信号通路免疫调节作用机制.方法:体外分离、培养人PBMC,设空白对照组和JYQR组,JYQR组加入JYQR刺激PBMC,与空白组经37℃,5％CO2培养24 h后,分别提取各组PBMC中总RNA、总蛋白、细胞上清液,RT-PCR和Western Blot法检测空白对照组和JYQR组PBMC中相关信号分子TLR2、MyD88、IRAK4、TRAF6、IRF3 mRNA和蛋白的表达情况,ELISA法检测细胞因子IL-1α、IL-6、TNF-α、IFN-α的分泌水平;分别设空白对照组:不作处理;JYQR组:JYQR 2.015 mg· mL-1;TLR2激动剂组:Parn3CSK4 300 ng·mL-1;TLR2抑制剂组:OxPAPC 30 μg·mL-1+ JYQR 2.015 mg·mL-14组,提取核蛋白和浆蛋白,West-ern Blot法检测IRF3和NF-κB p65的核转位情况.结果:与空白对照组相比,JYQR组中TLR2、IRAK4、TRAF6、IRF3 mR-NA表达水平分别上调5.93倍、1.77倍、2.95倍、1.43倍(*P＜0.05,**P＜0.01);MyD88、TRAF6蛋白的表达分别上调1.26倍、1.24倍(*P＜0.05),IRAK4和IRF3的相对表达水平差异无统计学意义;细胞因子IL-1a、IL-6的表达下调55％、61％,TNF-α、IFN-α的分泌水平上调4.3倍、2.9倍(*P＜0.05,**P＜0.01).JYQR预处理PBMC后,IRF3及NF-κB核转位增加,但是经过TLR2抑制剂预处理后,IRF3和NF-κB的核转位减弱;相反,TLR2激动剂预处理可以进一步上调IRF3和NF-κB的核转位.结论:金茵清热口服液对人PBMC中TLR2信号通路的作用机制可能是通过MyD88依赖型信号通路激活中、下游的IRAK4、TRAF6、IRF3以及NF-κB调控终端效应因子发挥免疫调节作用.