五个结核分枝杆菌重组蛋白及其组合物的细胞免疫评价

• 作者: 万康林 刘海灿 李娜 李马超 楼永良 肖彤洋 闫宇涵
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 关键词: 分枝杆菌,结核 重组蛋白质类 免疫,细胞 组合物 实验研究
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 539-545
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2020.05.107

摘要

目的 对5个结核分枝杆菌重组蛋白及其组合物的细胞免疫进行评价.方法 88份新鲜肝素抗凝人群外周静脉血液,其中42份来自北京市昌平区结核病防治所就诊的结核病患者,46份健康志愿者由中国疾病预防控制中心传染病所提供,均为接种过卡介苗(BCG)且没有结核暴露史和任何临床症状体征的健康人.以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv DNA为模板,PCR扩增选取的5个重组蛋白Rv3874、Rv3875、Rv2031c、Rv1411c和Rv3418c的完整编码基因;通过基因重组和蛋白纯化技术,分别克隆、表达和纯化5个重组蛋白作为刺激物,采用效应T细胞酶联免疫斑点试验(ELISPOT)对人群进行细胞免疫检测.结果 成功克隆、表达和纯化了Rv3874、Rv3875、Rv2031c、Rv1411c和Rv3418c重组蛋白;灵敏度分别为50.00％、71.43％、69.04％、73.81％和76.19％;特异度分别为86.96％、76.09％、71.74％、39.13％和36.96％.阳性预测值、阴性预测值、曲线下面积及约登指数分别为52.46％～77.78％、62.96％～74.47％、0.511～0.754和0.129～0.475.除Rv1411c和Rv3418c外,Rv3874、Rv3875和Rv2031c在结核病患者中检测到的斑点形成细胞数均高于健康志愿者,差异均具有统计学意义(P值均＜0.001).在5个重组蛋白所构成的26种组合物中,灵敏度为80.95％～95.24％,特异度为68.89％～24.44％.随着组合物中重组蛋白个数的增加其灵敏度逐渐增加,但特异度随之下降.结论 结核分枝杆菌重组蛋白Rv3874、Rv3875和Rv2031c刺激T细胞产生免疫应答的能力较强,具有一定的抗原性.而Rv1411c和Rv3418c单独用作诊断抗原的效能并不理想,与多组分抗原联合构成的组合物具有一定应用价值.