缺氧条件下乙酰肝素酶抑制剂PI-88对人视网膜血管内皮细胞自噬的影响

• 作者: 吕林 李树华 玄猛 胡洁 苏焜仪 苑玉鑫
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 乙酰肝素酶 PI-88 人视网膜血管内皮细胞 自噬 缺氧
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 397-402
• 页数: 6页
• 分类号: R77
• 字数: 4565字
• 语种: 中文

摘要

[目的]探讨乙酰肝素酶(Hpa)竞争性抑制剂PI-88在缺氧条件下对人视网膜血管内皮细胞(HREC)自噬水平的影响.[方法]以HREC为研究对象,设置3组:正常组,缺氧组(CoCl2处理的缺氧组)和实验组(CoCl2+PI-88组).观察免疫荧光染色检测自噬体特异性标记物LC3蛋白的表达;Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅰ与LC3-Ⅱ的表达;通过GFP-LC3腺病毒转染HREC,直接观察活细胞中由GFP-LC3标记的自噬水平.[结果]缺氧状态下,HREC内自噬标记蛋白LC3表达水平上调,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高(灰度值,与正常组比较,4.69±0.54比2.14±0.33,P=0.001<0.05),表明LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化明显增加.Hpa抑制剂PI-88可以抑制HREC的LC3表达,使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值下降(灰度值,与缺氧组比较,3.51±0.20比4.69±0.54,P=0.027<0.05),表明LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化水平下降,且活细胞内自噬体的形成减少.[结论]在缺氧状态下,抑制乙酰肝素酶可下调HREC中的自噬水平.