鳜脑神经元的原代培养与鉴定

• 作者: 何珊 彭建 梁旭方 石林杰
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鳜 脑 神经元细胞 原代培养
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 页码范围: 43-48
• 页数: 6页
• 分类号: Q2-33|S965.127
• 字数: 4235字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20190111630

摘要

目前鱼类神经细胞模型极少,物种间的差异性使鳜在细胞水平上的研究具有极大的局限性,为建立一种简单易行的鳜脑神经元细胞模型进一步研究鳜神经系统,本实验取3月龄鳜,联合胶原酶消化法和机械吹打法分离出鳜脑细胞,用含20％FBS的L15培养液制成细胞悬液接种在细胞培养瓶内,于28℃无CO2培养箱中培养,3 d后更换培养基,待细胞贴壁长满瓶底后进行传代培养;采用Neu-N和β-tubulin免疫荧光细胞化学技术鉴定鳜脑细胞神经元纯度.结果显示,鳜脑细胞分离培养2 d后贴壁状态较好,随着时间延长,贴壁细胞增多,细胞突起相互连接,培养5 d后神经元胞体丰满,细胞数量明显增多,突起相互间形成了明显的神经网络.经Neu-N和β-tubulin免疫荧光细胞化学技术鉴定鳜脑神经元细胞纯度可达95％以上.研究表明,该鳜脑细胞的分离培养方法简单易行,且可获得高纯度的鳜脑神经元细胞.