间充质干细胞培养物对巨噬样细胞分化和极化的影响

• 作者: 叶进培 吴长新 李洁 王丽清 王国霖 王谢东
• 来源期刊: 山西大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: MSCs培养物 THP-1 巨噬样细胞 分化 极化
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学与环境科学
• 页码范围: 635-643
• 页数: 9页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.13451/j.sxu.ns.2019022

摘要

为了探讨间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)培养物对人单核细胞系THP-1细胞和巨噬样细胞(THP-1经PMA诱导巨噬细胞样细胞,Macrophage-like cells,MΦ-like)分化的影响,从自脐带与胎盘连接处分离MSCs,通过荧光活化细胞流式分析(Fluorescence Activated Cell Sorting,FACS)细胞表面标志鉴定获得MSCs后,采集MSCs培养上清用于THP-1和M西-like的分化和极化的补充物.用FACS检测不同处理或分化的THP-1表面标志CD80、CD86、CD163、MHCⅡ的表达;同时结合实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析细胞因子IL-6、IL-8、IL-10、IL-12和IL-23 mRNA表达的变化,评价MSCs分泌物对THP-1分化和对LPS极化MΦ-like趋势影响.结果 表明:MSCs培养上清处理THP-1后,其CD80、CD86、MHCⅡ和CD163的表达水平没有变化,表明MSCs培养物没有明显诱导THP-1细胞分化;PMA处理24 h后添加MSCs培养上清波(pMSC)处理的THP-1,其表面标志CD163表达高于CD80、CD86和MHCⅡ,显示其向巨噬细胞(MΦ)Ⅱ型(M2)分化趋势;LPS的极化作用下调了pMSC分化的细胞的M2表面标志物CD163,但上调了MΦⅠ型(M1)表面标志物CD80和CD86,表明LPS诱导pMSC分化的THP-1获得的MΦ-like向M1极化.qRT-PCR分析表明,pMSC处理的THP-1比PMA单独处理的THP-1有较高IL-10与IL-8 mRNA表达;LPS极化引起pMSC处理获得的MΦ-like较高的IL-6和IL-8 mRNA表达上调.