抗GM-CSF纳米抗体的筛选与鉴定

• 作者: 周斌 周鹏 季艳伟 尚雨寒 张蕾 李山虎 李紫晨 郭鹏利
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 纳米抗体 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF) 生物淘选 噬菌体展示文库
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 148-154
• 页数: 7页
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 4380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2020.02.004

摘要

目的:制备抗粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)纳米抗体,并测定其亲和力.方法:分离提取GM-CSF免疫后羊驼外周血淋巴细胞总RNA,PCR扩增得到纳米抗体基因片段,与载体pHEN1重组后克隆至大肠杆菌TG1以构建初始文库,经拯救构建得到噬菌体展示纳米抗体文库,并对其进行生物淘选;通过大肠杆菌BL21(DE3)原核表达阳性纳米抗体克隆,并测定其亲和力.结果:构建了多样性良好且库容量为1.37×109 cfu的纳米抗体初始文库,3轮淘选后共筛选得到5株氨基酸序列差异性较大的纳米抗体,并对其中一株纳米抗体G1进行表达纯化,SDS-PAGE分析表明纳米抗体G1纯度较高,且有较高的亲和力(KD=2.95×10-8 mol/L).结论:制备了高亲和力的抗GM-CSF纳米抗体,可应用于相关炎症抗体药物研制和疾病监测等方面.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张蕾	北京大学化学与分子工程学院	119	992	16.0	27.0
2	李山虎	军事医学研究院生物工程研究所	27	69	5.0	6.0
3	周斌	北京大学化学与分子工程学院	12	51	5.0	7.0
4	周鹏	北京大学化学与分子工程学院	20	294	7.0	17.0
5	郭鹏利	西北农林科技大学食品科学与工程学院	1	0	0.0	0.0
6	尚雨寒	北京大学化学与分子工程学院	1	0	0.0	0.0
7	李紫晨	北京大学化学与分子工程学院	1	0	0.0	0.0