基于棉花亲水色谱从鸡蛋黄中分离纯化唾液酸化糖肽研究

• 作者: 李成 王仲孚 王承健 路宇 邹美义 陈庆辉 韩健利 魏明 黄琳娟
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 唾液酸化糖肽 亲水色谱柱 脱脂棉 鸡蛋黄
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 34-39
• 页数: 6页
• 字数: 4835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19756/j.issn.0253-3820.191317

摘要

鸡蛋黄中的唾液酸化糖肽(Sialylglycopeptide,SGP)的肽段部分由6个氨基酸(KVANKT)组成,其中天冬酰胺(N)被唾液酸化的复杂型N-糖链修饰.SGP主要从鸡蛋黄中分离获得,现有的SGP分离纯化方法操作繁琐,成本较高,难以规模化制备.本研究基于亲水相互作用色谱技术,用医用脱脂棉作为亲水色谱柱的固定相,建立了一种从鸡蛋黄中分离纯化唾液酸化糖肽的方法.首先将鸡蛋黄经苯酚处理得到唾液酸化糖肽的粗品,然后将糖肽粗品用水配成150 mg/mL的溶液,加入制备好的棉花亲水色谱柱中,依次用100％、95％、85％、75％(V/V)的乙腈-水溶液进行除杂,最后用去离子水洗脱唾液酸化糖肽.本方法操作简单,成本低廉.利用本方法从50个鸡蛋黄中制备得到了300 mg SGP,经高效液相色谱(HPLC)鉴定,其纯度高达95％,同时采用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对SGP及其糖链组成和糖基化位点进行了表征.